Ваш регион -
Ежедневно с 8:00 до 20:00
8 (800) 700-45-82
Бесплатно по России
Москва и МО

Микробиологическое исследование

Наиболее чувствительным, но, вместе с тем, трудоемким методом лабораторной диагностики хламидийной инфекции является микробиологическое исследование. Для размножения in vitro патогенов (Chlamydia spp.) чаще всего используют клетки линии Hela или McCoy. Продолжительность микробиологического исследования в среднем составляет 4-7 дней. Этот метод исследования один из самых высокоспецифичных. Чувствительность микробиологического метода во многом зависит от правильности взятия и доставки биологического материала на исследование, качества питательных сред, строгого соблюдения правил культивирования, квалификации врачей-микробиологов и т.д. Несоблюдение техники взятия биологического материала на исследование, условий транспортировки и культивирования могут привести к получению ложноотрицательных результатов.

Выделение хламидий в культуре клеток МсСоу

Для этой цели обычно используют чувствительную культуру клеток, обработанную циклогексимидом. Чувствительность микробиологического метода по сравнению с ПЦР составляет 70-80%, но в то же время микробиологический метод исследования превосходит молекулярно-биологические методы диагностики по специфичности. В литературе описаны случаи выявления Сhlamydia trachomatis методом ПЦР при отрицательных результатах микробиологмческого исследования и наоборот.

Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим методом являются:

  • Беременность с отягощенным акушерским анамнезом.
  • Оценка эффективности проведенного антибактериального лечения.
  • Выявление чувствительности и резистентности к антибактериальным препаратам.
  • Выявление хламидий у ВИЧ-инфицированных или лиц с вторичными иммунодефицитными состояниями (онкологические больные после проведенных курсов лучевой и химиотерапии, трансплантации костного мозга; лица, получающие иммунодепрессанты; больные вирусным гепатитом и туберкулезом).
  • Бесплодие неясного генеза.
  • Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.

Микробиологический метод исследования является референс-методом при оценке эффективности антибактериального лечения. При исследовании биологического материала методом ПЦР после курса антибиотикотерапии, если оно проводится ранее, чем через месяц после ее окончания, можно получить ложноположительные результаты. Это связано с тем, что невозможно однозначно оценить жизнеспособность микробной клетки на основании выявления фрагмента ее генома, используя только данные молекулярно-биологических методов. В этом случае при исследовании клинического материала с помощью микробиологического метода микробные клетки, потерявшие эти важные с клинической точки зрения свойства, не дадут роста в клеточной культуре.

Для транспортировки и хранения клинического материала используют специальную транспортную среду. Она разливается в пенициллиновые флаконы по 1 мл и хранится при температуре +40C - +80С в течение 2-х месяцев. Состав транспортной среды: среда МЕМ с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота и гентамицина в концентрации 50 мкг/мл.

Клинический материал после перенесения в транспортную среду хранится при температуре + 40С - +80С и в течение двух суток должен быть доставлен в лабораторию.

Процедура заражения клеток

  1. Обработка однодневной клеточной культуры McCoy 1% раствором ДЕАЕ декстраном в течение 30 минут;
  2. Заражение обработанных клеток материалом, полученным от больных;
  3. Центрифугирование зараженных клеток при 2500 g в течение 60 минут;
  4. Отмывка клеток питательной средой;
  5. Добавление к клеткам ростовой среды, содержащей циклогексимид;
  6. Инкубирование клеток в течение двух суток при +360 C;
  7. Обнаружение хламидий в клетках методом ПИФ или ПЦР.

Реальный срок получения результатов этим методом – семь дней.

В настоящее время в литературе растет число сообщений о случаях резистентности хламидий к антибактериальным препаратам (макролидам, тетрациклинам, фторхинолонам). При проведении микробиологического метода исследования возможно не только выделение чистой культуры возбудителя, определение антибиотикоустойчивости, но и индивидуальный подбор противохламидийной терапии.

Схема выявления устойчивости Chlamydia trachomatis к антибактериальным препаратам

  1. Чувствительные клетки линии McCoy заражаются культурой Chlamydia trachomatis, выделенной от больного
  2. К зараженным клеткам добавляют ростовую среду, содержащую антибиотик в различных дозах
  3. Зараженные клетки инкубируют 2-3 дня при температуре +370C
  4. Чувствительность к антибиотику определяется по подавлению роста культуры Chlamydia trachomatis в зараженных клетках, то есть по снижению числа клеток с внутриклеточными включениями.
Популярные анализы
Все анализы
Кат. № Наименование Тип Цена* Обыч. Сроч.** Заказать
22.01 Общий анализ мочи колич./кач./полуколич. 280 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
19.01 Общий клинический анализ крови (ЛФ + СОЭ) колич. 590 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
09.32 Анализ креатинин колич. 220 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
09.25 Анализ холестерин общий (ХС) колич. 220 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
09.18 Анализ глюкоза колич. 200 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
09.04 Анализ билирубин общий колич. 220 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
09.01 Анализ АЛТ (аланинаминотрансфераза) колич. 220 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
07.12 Анализ ТТГ (тиреотропный гормон) колич. 440 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
07.09 Анализ Т4 (тироксин) свободный колич. 440 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать
07.03 Анализ пролактин колич. 440 руб. 1 р.д. 2-5 ч.
Заказать

* Стоимость лабораторных исследований без учёта стоимости забора биоматериала. Цены действительны для московского региона.
** Срочное исполнение действительно только для московского региона.